我國(guó)8種重要藥用真菌研究進(jìn)展 ——藥用真菌??蜓?/h1>
發(fā)布時(shí)間:2017-02-10
《菌物學(xué)報(bào)》新年推出“藥用真菌專刊”
特約編輯:戴玉成 主編
中國(guó)是世界上藥用真菌生產(chǎn)和消費(fèi)第一大國(guó),近年來我國(guó)對(duì)藥用真菌的栽培、活性物質(zhì)、藥理活性、產(chǎn)品加工、保健品和藥品開發(fā)及利用等方面的研究都取得了重要進(jìn)展,例如,近30年來已經(jīng)對(duì)靈芝和冬蟲夏草等最重要的藥用真菌開展了深入系統(tǒng)的研究,2014年我國(guó)靈芝總產(chǎn)量已經(jīng)達(dá)到1億千克,市場(chǎng)規(guī)模達(dá)到150億人民幣,與此同時(shí),研究報(bào)道逐年增加,例如,據(jù)中國(guó)知網(wǎng)統(tǒng)計(jì)2006至2015年我國(guó)每年關(guān)于靈芝研究的中文報(bào)道超過120篇,同期SCI收錄的有關(guān)靈芝的論文每年超過230篇。特別是近年來關(guān)于桑黃和樺褐孔菌等新興藥用真菌的研究更是方興未艾(杜文婧和王琦 2013;吳升華等 2016;鐘秀宏等 2016;朱琳和崔寶凱 2016),因此藥用真菌一直是我國(guó)近年來真菌學(xué)研究的一個(gè)熱點(diǎn)領(lǐng)域。本期《菌物學(xué)報(bào)》“藥用真菌??笔珍浟?0篇文章,重點(diǎn)反映我國(guó)近年來在蛹蟲草Cordyceps militaris及蟲草類Cordyceps s.l.、白囊耙齒菌Irpex lacteus (Fr.) Fr.、豬苓Polyporus umbellatus (Pers.) Fr.、茯苓Wolfiporia cocos (F.A. Wolf) Ryvarden & Gilb.、蟬花蟲草Ophiocordyceps sobolifera (Hill ex Watson) G.H. Sung et al.、二型附毛孔菌Trichaptum biforme (Fr.) Ryvarden和桑黃Sanghuangporus sanghuang(Sheng H. Wu, T. Hatt. & Y.C. Dai) Sheng H. Wu et al.等重要藥用真菌研究的進(jìn)展。
綜述文章是對(duì)藥用真菌熱點(diǎn)研究或藥用真菌新資源的總結(jié)。董曉明等(2017)對(duì)白囊耙齒菌這一廣泛分布、可用于治療腎小球腎炎的藥用多孔菌的形態(tài)特征、分布、生態(tài)習(xí)性、菌絲體培養(yǎng)和液體發(fā)酵、人工栽培、多糖的提取及其對(duì)腎臟作用、胞外酶及影響產(chǎn)酶因素等進(jìn)行了總結(jié),同時(shí)對(duì)國(guó)內(nèi)外有關(guān)白囊耙齒菌專利和應(yīng)用進(jìn)行了比較分析,并提出了目前研究中存在的問題,為其生物學(xué)研究和開發(fā)利用提供了依據(jù)和借鑒。傘形多孔菌是一種大型真菌,廣泛分布于北半球,其菌核為豬苓且與蜜環(huán)菌關(guān)系密切(柳玲玲等 2015)。豬苓作為中藥在我國(guó)有2 000多年的應(yīng)用歷史。陳曉梅等(2017a)對(duì)豬苓的主要化學(xué)成分包括多糖類、甾體類、三萜類、蒽醌類及其他化合物的結(jié)構(gòu)等進(jìn)行了總結(jié),在此基礎(chǔ)上論述了豬苓的主要藥理活性,包括利尿和腎臟保護(hù)、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗輻射、抗突變等。其中多糖和甾酮類化合物是豬苓的主要活性成分,均具有抗腫瘤作用,它們對(duì)于藥材豬苓的質(zhì)量控制和品質(zhì)評(píng)價(jià)具有重要意義,此外還指出加強(qiáng)對(duì)豬苓多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)及其衍生物的研究及開展治療腫瘤和慢性肝炎的臨床應(yīng)用是今后豬苓研究的重要方向。蛹蟲草又名北蟲草、北冬蟲夏草,是蛹蟲草菌侵染昆蟲蛹或蟲形成的子實(shí)體,多發(fā)現(xiàn)于溫帶及低海拔的生境(林地),世界范圍內(nèi)分布廣泛,在我國(guó)主要分布于吉林、遼寧、山西、河北、陜西、安徽、廣西、廣東、云南、福建、四川等地,作為藥食兩用的真菌資源,蛹蟲草已被廣泛認(rèn)識(shí)和接受(董彩虹等 2016)。文庭池等(2017)對(duì)蛹蟲草的寄主、分類學(xué)、菌種選育、人工培養(yǎng)、交配型、活性成分及其藥效、蛹蟲草產(chǎn)業(yè)化及發(fā)展趨勢(shì)等方面進(jìn)行了論述,同時(shí)對(duì)目前研究和生產(chǎn)中存在的問題如子實(shí)體人工培養(yǎng)的退化、產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和有效成分含量、食品安全、產(chǎn)品深加工和新產(chǎn)品的研發(fā)等方面進(jìn)行了分析。此外還對(duì)蛹蟲草和冬蟲夏草進(jìn)行了詳細(xì)比較,指出優(yōu)良菌種選育、高產(chǎn)技術(shù)、提高有效成分含量、生物合成、產(chǎn)業(yè)規(guī)?;c規(guī)范化以及產(chǎn)品深加工等方面都是今后蛹蟲草研究與開發(fā)的重要內(nèi)容。其中,N6-(2-羥乙基)腺苷(簡(jiǎn)稱HEA)是蟲草菌絲體中得到的第一個(gè)生物來源的鈣離子拮抗劑,具有抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)、降低炎癥反應(yīng)、保護(hù)腎臟、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛和抗驚厥等多種功效,目前已成為研究熱點(diǎn)。劉寬博等(2017)對(duì)產(chǎn)生HEA的真菌種類和菌株來源、生理功能、生物合成、提取測(cè)定、分離純化、化學(xué)合成的研究現(xiàn)狀等方面進(jìn)行了總結(jié),對(duì)有關(guān)專利進(jìn)行了評(píng)價(jià)和分析,提出從種質(zhì)資源入手拓寬HEA來源,優(yōu)化HEA的提取純化方法,并深入探究其生物合成途徑,為HEA的深入研究和開發(fā)應(yīng)用提供了借鑒。
研究論文是對(duì)二型附毛孔菌抗氧化活性、蟬花蟲草HEA的鎮(zhèn)痛作用、豬苓甾酮類化合物的含量測(cè)定及指紋圖譜、豬苓菌絲形成菌核差異蛋白質(zhì)組學(xué)、MC-UVE波長(zhǎng)選擇法在近紅外光譜對(duì)茯苓的鑒定和桑黃抗氧化活性等方面的研究。楊曉坡等(2017)對(duì)不同光照和pH條件下藥用真菌二型附毛孔菌液體培養(yǎng)過程中的抗氧化活性進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)一定的光照可提高二型附毛孔菌分泌次級(jí)代謝產(chǎn)物的能力及抗氧化活性,14d光照條件下,多酚含量和總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)分別在第12天和第10天達(dá)到峰值,黑暗和光照交替的條件下,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性在第2天達(dá)到最大值。不同pH條件對(duì)二型附毛孔菌液體培養(yǎng)過程中的抗氧化活性影響更大。當(dāng)pH為9.0時(shí),二型附毛孔菌在液體培養(yǎng)過程中分泌的多酚含量、T-AOC、SOD活性和DPPH自由基清除能力均最高。朱偉堅(jiān)等(2017)采用轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)探索了蟬花蟲草中分離提取的HEA對(duì)痛風(fēng)模型大鼠疼痛相關(guān)基因表達(dá)情況的影響,發(fā)現(xiàn)932個(gè)基因存在差異表達(dá),其中有57個(gè)差異表達(dá)的基因與疼痛相關(guān),12個(gè)基因與鎮(zhèn)痛相關(guān),包括上調(diào)表達(dá)的腺苷A1受體基因(Adora1)及A2A受體基因(Adora2a)。而HEA可誘導(dǎo)鎮(zhèn)痛靶標(biāo)受體腺苷A1受體表達(dá)上調(diào)、腺苷A2A受體表達(dá)下調(diào),指出蟬花蟲草的鎮(zhèn)痛活性物質(zhì)就是HEA,其可能是通過激活腺苷A1受體、下調(diào)A2A受體及調(diào)控一系列疼痛相關(guān)基因以發(fā)揮鎮(zhèn)痛的作用。陳曉梅等(2017b)對(duì)采自全國(guó)12個(gè)省區(qū)35個(gè)豬苓樣品中5個(gè)甾酮類化合物的含量進(jìn)行了測(cè)定,在此基礎(chǔ)上獲得了它們的指紋圖譜并對(duì)圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)豬苓酮A和B的含量之間呈極顯著正相關(guān),陜西省樣品平均總甾酮含量及豬苓酮A和B的相對(duì)含量均最高,35個(gè)樣品之間指紋圖譜相似度達(dá)0.412–0.943,11個(gè)陜西省樣品之間指紋圖譜相似度達(dá)0.812–0.989,研究表明該省的豬苓質(zhì)量好且穩(wěn)定,進(jìn)一步說明豬苓酮A和B是豬苓的主要甾酮類成分,對(duì)藥材豬苓的質(zhì)量控制有重要意義。李兵等(2017)對(duì)豬苓的蛋白質(zhì)組學(xué)進(jìn)行了研究,成功鑒定了豬苓菌絲形成菌核的初始期、菌核生長(zhǎng)期和成熟期的蛋白質(zhì)組,共鑒定蛋白1 391個(gè)。對(duì)初始期菌絲和菌核進(jìn)行了差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究,發(fā)現(xiàn)豬苓菌絲形成菌核過程中有378個(gè)蛋白差異表達(dá),差異蛋白參與的蛋白功能和生物學(xué)過程以催化和結(jié)合為主,還參與感知環(huán)境刺激、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、電子轉(zhuǎn)移、過氧化活性、菌絲生長(zhǎng)及胞壁合成等過程。分析得到豬苓菌絲形成菌核可能是由于缺氧或溫差等多種環(huán)境脅迫誘導(dǎo)所致,生成活性氧并形成氧化應(yīng)激狀態(tài),進(jìn)而促進(jìn)豬苓菌絲極性生長(zhǎng)和菌絲形態(tài)學(xué)變化以形成菌核。代謝通路分析表明差異蛋白還主要參與了糖、脂質(zhì)和氨基酸等初級(jí)產(chǎn)物以及甾醇、多聚乙酰等次級(jí)代謝產(chǎn)物的合成與代謝。因此,對(duì)差異蛋白質(zhì)組的深入解析和研究有利于揭示豬苓菌絲形成菌核的蛋白分子機(jī)制。趙艷麗等(2017)利用近紅外光譜對(duì)云南不同產(chǎn)區(qū)的藥用真菌茯苓進(jìn)行了鑒別,發(fā)現(xiàn)通過主成分-馬氏距離(PCA-MD)分析得到的白茯苓和茯苓皮的近紅外光譜在主成分得分空間內(nèi)呈現(xiàn)出較大差異。構(gòu)建不同產(chǎn)區(qū)茯苓的鑒別模型可以將白茯苓和茯苓皮分開,通過最優(yōu)主成分和采用MC-UVE法分別構(gòu)建了白茯苓和茯苓皮的分類模型,預(yù)測(cè)正確率分別由85.71%和83.33%提高至100%,在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步采用逐步判別分析法篩選出白茯苓和茯苓皮的光譜變量,建立Fisher判別方程,回代驗(yàn)證正確率均大于85.7%,交叉驗(yàn)證正確率均大于66.7%,表明所建立的Fisher判別方程能較好地鑒別不同產(chǎn)區(qū)的茯苓。鄭飛等(2017)以桑黃菌絲體生物量、多酚含量、黃酮含量、抗壞血酸(Ascorbic acid,AA)含量、T-AOC、抑制羥自由基能力、超氧陰離子清除能力、DPPH自由基清除能力、2,2’-連氮-雙(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)[2,2’-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline- 6-sulphonic acid),ABTS]自由基清除能力、鐵離子還原能力和亞鐵離子螯合能力為測(cè)定指標(biāo),對(duì)桑黃液體培養(yǎng)過程中的抗氧化活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)和分析,發(fā)現(xiàn)菌絲體生物量在2–10d內(nèi)增長(zhǎng)迅速,第10天達(dá)到最大值,在此過程中AA含量和T-AOC也出現(xiàn)了峰值,且多酚含量、黃酮含量和鐵離子還原能力均呈上升趨勢(shì),說明菌株的抗氧化活性與其自身的生長(zhǎng)狀況、次級(jí)代謝產(chǎn)物分泌及還原能力等密切相關(guān)。此外,該菌株對(duì)羥自由基、超氧陰離子、DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力也較強(qiáng),表現(xiàn)出明顯的抗氧化活性。較高的亞鐵離子螯合能力也說明桑黃在氧化脅迫下可啟動(dòng)自身的抗氧化系統(tǒng)以阻斷自由基鏈反應(yīng)。